fa جداسازی اندام تولید سم و روش استخراج و شناسایی کونوتوکسین‌ها در حلزون‌ مخروطی Conus terebra thomasi پژوهشي Research/ Original/ Regular Article حلزون‌های مخروطی (Conus) گروهی از نرم‌تنان دریایی هستند که به‌منظور اهداف متفاوت، ترکیبات سمی (کونوتوکسین‌ها) را تولید می‌کنند. در مطالعات متعددی خواص دارویی کونوتوکسین‌ها و وجود ترکیبات سمی متفاوت در بخش‌های مختلف اندام مولد سم در گونه‌های مختلف بررسی شده است. شناخت ساده‌ترین و مناسب‌ترین روش برای جداسازی اندام تولید سم و استخراج کونوتوکسین‌ها ضروری به نظر می‌رسد. بدین منظور تعدادی گونه‌ی Conus terebra thomasi از سواحل بخش‌های شمالی جزیره‌ی لارک (خلیج فارس) جمع‌آوری و صدف نمونه‌ها بوسیله‌ی گیره‌ی آهنی به آرامی شکسته شد. بعد از خارج سازی حیوان از صدف، خارج سازی دستگاه مولد سم با ایجاد یک برش کوچک در منطقه‌ی پشتی عضله‌ی پا انجام شد. دستگاه مولد سم با دقت به 3 بخش حباب سم، بخش ابتدایی مجرا و بخش انتهایی مجرای سم تقسیم و فریزدرای شدند. عصاره‌گیری با 3 حلال مختلف (استون خالص، مخلوط استون خالص- متانول20% و بافر فسفات نمکی) انجام و میزان پروتئین کل با روش برادفورد اندازه‌گیری شد. نتایج نشان داد که میزان پروتئین کل در دو عصاره‌ی استونی و استونی متانولی بسیار کم و در حلال بافر فسفاتی قابل ملاحظه (حباب سم: 79/38، بخش ابتدایی مجرا: 4/52 و بخش انتهایی مجرا: 01/46 میلی‌گرم/گرم بافت خشک) است. با استفاده از روش الکتروفورز عمودی کونوپپتیدهای مختلفی در بخش‌های مختلف دستگاه مولد سم مشاهده شد. همچنین بین حلال‌های بررسی شده، بافر فسفات نمکی مناسب معرفی می‌شود که علاوه بر بالا بودن کونوپپتیدهای استخراجی، احتمال آسیب دیدگی آنها از بین رفته و مناسب برای بررسی خواص زیست فعالی آنها خواهد بود. Cone snails (genus: Conus) are groups of marine mollusks that make a group of toxin compounds (conotoxins) for different purposes. Several studies proved the medical properties of conotoxins and existence of different toxic compounds in different parts of venom apparatus. So, recognizing the simplest and the most suitable method for separating the venom apparatus and purification of conotoxins is necessary. For this purpose, several specimens of Conus terebra thomasi were collected from the Northern sandy coast of Larak Island and the shells of samples were cracked by vice. After pulling out the snail from its shell, drawing out of the venom apparatus was done by cutting the posterior section of foot muscle. Venom apparatus was divided into three parts, venom bulb, proximal and distal venom duct and each sample was freeze-dried. Extraction was done by three solvents (Acetone 100%, A mixture of Acetone100%-Methanol20% and Phosphate Buffered Saline) and the total protein of each extract was determined by Bradford protein assay. The results showed that the amount of total protein in two extracts (Acetone and Acetone-Methanol) were very low and cannot be measured by this method, but it is measurable in third extract (venom bulb: 38.79, proximal venom duct: 52.4 and distal venom duct: 46.01 mg/g dried tissue). By using electrophoresis method, different conopeptides were shown in different parts of venom apparatus. Also, the most suitable solvent between the checked solvents in this study is phosphate buffered saline because of high concentration of extracted conopeptides, and reducing the risk of tissue damage. Meanwhile, the extracted compounds are suitable for investigating their bioactivity. : کونوس, کونوتوکسین, دستگاه مولد سم, تشریح, خلیج فارس Conus, Conotoxin, Venom apparatus, Dissection, Persian Gulf 79 85 http://joc.inio.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-204&slc_lang=fa&sid=1 Parva Dehghani پروا دهقانی 10031947532846003427 10031947532846003427 No Saber Khodabande صابر خدابنده surp78@gmail.com 10031947532846003428 10031947532846003428 Yes Iraj Nabipour ایرج نبی پور 10031947532846003429 10031947532846003429 No